Protocole ExAO permettant de montrer

 l'influence des mutations

sur le métabolisme des levures

(Saccharomyces cerevisiae)

 

 

 

PROTOCOLE

 

1er Temps (Levures "sauvages")

ð Placer 8 ml de levures "sauvages" dans la cuve du bio réacteur et l’agitateur magnétique dans la cupule située au centre du bio réacteur.

ð Placer la sonde à O2 dans le couvercle du bio réacteur de même,

ð Placer délicatement le couvercle sur le bio réacteur, fermer les ouvertures inutilisées.

ð Préparer une seringue de solution de "saccharose" en veillant à chasser toute bulle d’air.

ð Mettre l’agitateur en route

ð Configurer le paramètre du logiciel : temps d’expérience (4 minutes).

ð Préparer l'acquisition en la nommant ("levures sauvages") et appeler le professeur pour vérification du dispositif.

 

a b

 

ð Lancer l’acquisition en cliquant sur "OK".

ð Au bout de 1 minute, injecter à l’aide de la seringue 0,8 mL de saccharose.

ð A la fin de l’expérience, laver la cuve du bio réacteur (attention de ne pas perdre l'agitateur),  conserver à l'écran la courbe obtenue.

2ème Temps (Levures "mutées")

ð Placer 8 ml de levures "mutées" dans la cuve du bio réacteur et l’agitateur magnétique dans la cupule située au centre du bio réacteur.

ð Placer la sonde à O2 dans le couvercle du bio réacteur de même,

ð Placer délicatement le couvercle sur le bio réacteur, fermer les ouvertures inutilisées.

ð Préparer une seringue de solution de "saccharose" en veillant à chasser toute bulle d’air.

ð Mettre l’agitateur en route

ð Configurer le paramètre du logiciel : temps d’expérience (4 minutes).

ð Faire une nouvelle acquisition (la nommer : "levures mutées") en conservant les résultats précédents.

 

a b

 

ð Lancer l’acquisition en cliquant sur OK.

ð Au bout de 1 minute, injecter à l’aide de la seringue 0,8 mL de saccharose.

ð utiliser les fonctionnalités du logiciel pour annoter les graphiques ; faire une copie d'écran des graphiques obtenus et l'enregistrer.

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