Extraction des chloroplastes des feuilles
- Peser 10 g de feuille d’épinard , les découper en fines lamelles dans le mortier
- Ajouter 3 ml de tampon tris-saccharose et un peu de sable
- Commencer à broyer puis ajouter progressivement en cours de broyage 20 mL de solution tampon phosphate saccharose.
- Broyer fermement pendant au moins 2 minutes.
- Filtrer dans un entonnoir garni de gaz (3 ou 4 épaisseurs) et de coton hydrophile.
- Presser pour obtenir le maximum de filtrat.
- Conserver la suspension de chloroplastes à l’obscurité (erlenmeyer enveloppé de papier aluminium) jusqu’au moment de la mesure.

Expérience similaire à Hill : élaborer un protocole montrant que la production de O2 exige à la fois de la lumière et une substance oxydante, le réactif de Hill.

Liste de matériel
Dispositif EXAO (bioréacteur, sonde O2, lampe, seringue)
Filtrat contenant les chloroplastes
le réactif de Hill (substance oxydante)
 

Remarque: Lors de l'extraction, le composé "R", oxydant naturellement présent dans les chloroplastes, se retrouve en quantité insignifiante dans le filtrat. Dans l'expérience  on utilise une solution de d'hexacyanoferrate de potassium (le réactif de Hill) qui est susceptible de jouer le rôle d'oxydant.