Expérience de Hill

On souhaite vérifier que l'énergie lumineuse permet la photolyse de l'eau en présence d'un accepteur d'électrons.

Pour cela, on se propose de réaliser l'expérience historique de Hill :

Matériel disponible et protocole pour reproduire l'expérience historique de Hill :

Matériel :

 

Pour l'expérience de Hill :

- dispositif EXAO (bioréacteur, sonde O2, lampe, seringue, agitateur)
- suspension de chloroplastes
- réactif de Hill (ferricyanure de potassium)

- seringue

- pipette 10mL + propipette

 

Protocole à lire entier avant de commencer :


Expérience similaire à Hill  Utilisation du dispositif ExAO:

a) Montage (avant de réaliser la mesure) :

 

- Vérifier que l'agitateur aimanté est bien présent dans la cuve.

- Prélever 10mL de suspension de chloroplaste à l'aide de la pipette équipée d'une propipette

- Verser les 10 mL de suspension de chloroplastes dans la cuve du bioréacteur du dispositif EXAO

- Fermer le bioréacteur

- Insérer délicatement la sonde oxymétrique dans un trou latéral couvercle du bioréacteur

- Vérifier que la sonde soit bien immergée en regardant à travers la solution.

ATTENTION à ce que l'agitateur ne tape pas dans la tête de sonde

- Lancer l'agitation (agitation moyenne)

- Préparer la seringue contenant 0.3 mL de réactif de Hill sans l'introduire dans le bioréacteur

- Régler la position de la lampe

- Ajuster les volets du bioréacteur (ouvert ou fermé en fonction du moment de l'acquisition : voir ci-dessous)

 

b) Paramétrer le le logiciel ExAO :

 

- Démarrer le logiciel Atelier scientifique (icône AS sur le bureau)

- Choisir le module "Généraliste" = la grenouille

- Positionner l'oxymètre sur l'axe des ordonnées et choisir "liquide"

- Positionner le chronomètre sur l'axe des abscisses, paramétrer 12 min de durée d'acquisition

- Quand vous serez prêts cliquer sur le feu vert pour démarrer l'acquisition

 

c) Acquisition :

- 3 min à l'obscurité

- 3 min à la lumière

- injection du réactif de Hill

- 3 min à la lumière

- 3 min à l'obscurité

 

- comparez avec le document de secours et/ou appeler l'enseignant pour vérification

 

Après l'enregistrement :

   

- ranger le matériel comme vous l'avez trouvé (/!\ attention aux barreaux aimantés des agitateurs magnétiques /!\)

- Imprimer votre courbe/celle de secours

- annoter la courbe avec les différentes conditions expérimentales

- analyser les résultats en relation avec les conditions expérimentales pour répondre au problème

             

Sécurité

Précautions de la manipulation