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Les cœlomocytes sont des cellules phagocytaires présentes chez les huîtres. |
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Protocole expérimental : 1. Prélever 5 ml de levure à l'aide d'une pipette et d'une propipette, les déposer dans le bécher. Rajouter 3 gouttes de bleu de méthylène. Mélanger et attendre 5 minutes (lire la suite du protocole en attendant). 2. Injecter 5 mL solution de levures à l’aide de la seringue, directement dans l’ouverture effectuée dans la coquille (piquer légèrement le corps mou de l’animal pour stimuler la réaction immunitaire). Remarque : Les levures ont été préalablement colorées au bleu de méthylène afin de les rendre plus visibles. 3. Laisser l’huître ainsi stimulée pendant 30 minutes (temps nécessaire à l’activation des cellules phagocytaires) 4. Jeter le premier liquide rendu, soit directement soit en l’aspirant. Attendre 5 minutes qu’un nouveau liquide se reforme. 5. Prélever ce nouveau liquide formé directement dans la cavité à l’aide d’une seringue et déposer une goutte de ce liquide au niveau d'une encoche d'une lame de comptage Kova. Attention de ne pas prélever trop d’impuretés en prélevant le liquide de la cavité palléale. Remarque : Cette lame possède 10 compartiments. Il faudra identifier celui que vous avez utilisé (en faisant une croix dessus à la fin de la manipulation) afin que le prochain groupe utilise un autre compartiment. 6. Attendre quelques minutes : les cellules se déposent au fond de la lame. 7. Observer au microscope optique à un grossissement adapté. 8. Prendre une série de photographies ou un film de la phagocytose de levures par des cœlomocytes.
Aide à l'observation : vidéo du résultat attendu (ouvrir dans une nouvelle fenêtre) Repérer des cœlomocytes à leur forme caractéristique (cf vidéo) sur votre préparation.
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